威尼斯大运河是威尼斯的主要水道，沿自然水道自圣马可教堂至圣基亚拉教堂呈反S型，并且与许多小运河相连。市内交通运输大部分通过这些水道。大运河呈倒S型，从西北面的罗马广场蜿蜒抵达圣马可广场，长约4公里，深约6米，宽40到100米，是威尼斯较重要的交通要道。沿岸两旁多达100多座古老建筑。每年9月份都有威尼斯的传统赛舟会，也就是在大运河上举办的贡多拉和其他传统船只的比赛，赛前还会有装饰成15世纪风格的船只供游客观赏。